|
УДК: [613.29:543]:006.005(476)
Год издания: 2019
Определение холина в пищевой продукции спектрофотометрическим методом
Белышева Л.Л., Полянских Е.И., Войтенко С.И., Воронцова О.C.
Рубрики: 76.33.35, 84.15.19
Научно-практический центр гигиены
Тема НИР: «Разработать и внедрить методики и государственные стандарты Республики Беларусь определения пищевых добавок (синтетических красителей, холина) в продуктах питания», № госрегистрации 20160009.
Сроки выполнения НИР: июль 2015 г. — декабрь 2018 г.
Научный руководитель: Л.Л. Белышева.
Источник финансирования: Республиканский централизованный инновационный фонд.
Одним из наиболее важных витаминов, участвующих в развитии организма, является холин, который обладает мембранопротекторным, антиатеросклеротическим, ноотропным, антидепрессантным, успокаивающим действием. Содержание данного витамина в пищевой продукции, предназначенной для питания детей с рождения и старше, в специализированных продуктах для лечебного питания, питания беременных и кормящих женщин регламентировано требованиями технического регламента Евразийского экономического союза 027/2012. Однако отсутствие официальной стандартизированной методики определения холина не позволяет осуществлять контроль его содержания в данной продукции.
Цель исследования - разработать метрологически аттестованную методику (МВИ) и государственный стандарт Республики Беларусь (СТБ) количественного определения холина в пищевой продукции спектрофотометрическим методом.
Основными этапами разработанной методики являются: выделение холина из пищевых матриц путем высвобождения связанных форм холина с помощью кислотного гидролиза, реакция высвободившегося холина с раствором рейниката аммония для образования комплекса рейниката холина ([(CH3)3NCH2CH2OH]•[Cr(NH3)2(SCN)4]), растворение полученного осадка рейниката холина в ацетоне и определение оптической плотности полученного раствора спектрофотометрическим методом при длине волны 526 нм.
При разработке методики основное внимание было уделено стадиям пробоподготовки. Экстракцию холина из анализируемой пробы согласно разработанной методике производят с помощью 20 % раствора азотной кислоты на кипящей водяной бане в течение 2 ч. Далее выделившийся холин осаждают рейникатом аммония: добавляют 15 мл спиртового раствора рейниката аммония и помещают в морозильную камеру на 18 ч для образования окрашенного комплекса. Выпавший осадок рейниката холина отфильтровывают через бумажный фильтр и промывают холодным изопропиловым спиртом. Высушенный при комнатной температуре фильтр с кристаллами рейниката холина растворяют в ацетоне. Замеряют объем. Оптическую плотность полученных растворов измеряют на спектрофотометре при длине волны 526 нм относительно ацетона.
Концентрацию холина в пищевом продукте определяют по предварительно построенному градуировочному графику, для построения которого используют градуировочные растворы стандартного образца холина хлорида, прошедшие через все стадии анализа.
Установлены метрологические характеристики методики: повторяемость, промежуточная прецизионность и расширенная неопределенность, которые составили 19,3, 23,4 и 26,3 % соответственно.
Диапазон измерений массовой концентрации холина от 40,0 до 75 000,0 мг/кг. Предел количественного определения (LOQ) холина составляет 40,0 мг/кг.
Разработанные методики выполнения измерений МВИ.МН 5903-2017 «Массовая концентрация холина в пищевой продукции. Методика выполнения измерений спектрофотометрическим методом» и СТБ 2545-2019 «Продукция пищевая. Спектрофотометрический метод определения холина» утверждены в установленном порядке и внесены в реестр средств измерения Республики Беларусь. Данные стандарты применимы для определения содержания холина в пищевой продукции, в т. ч. для детского, диетического, спортивного питания, а также биологически активных добавках к пище (БАД).
Область применения: гигиеническая оценка качества и безопасности пищевой продукции, лабораторные исследования для целей контроля производства, сертификации, декларирования параметров качества и безопасности пищевой продукции.
Рекомендации по использованию: методика и государственный стандарт Республики Беларусь определения холина в пищевой продукции рекомендуются к применению лабораториями санитарно-эпидемиологической службы различных уровней при наличии оборудования, научными учреждениями для оценки качества и безопасности пищевой продукции.
Предложения по сотрудничеству: совместные исследования с отраслевыми научно-исследовательскими учреждениями по научным разработкам в области качества и безопасности пищевых продуктов, а также консультативная помощь в освоении методов.