Контроль качества питьевой воды по вирусологи­ческим показателям имеет приоритетное значение в общей системе эпиднадзора за вирусными инфекция­ми. Поэтому создание и внедрение в практику лабо­раторных служб стандартных лекарственных средств, основанных на использовании современных техноло­гий изоляции вирусных агентов из водной среды и их специфической индикации, является актуальным на­правлением исследований санитарной вирусологии.

Цель - разработка комплексного санитарно-вирусологического лекарственного средства для экспресс-индикации вирусного загрязнения объектов питьевого водоснабжения, включающего комплект реа­гентов для улавливания и последующей ПЦР-детекции вирусов-контаминантов воды.

В ходе создания технологии улавливания вирусов из водной среды разработана техническая документа­ция и сконструировано специальное фильтрационное устройство (насадка на водопроводный кран) для от­бора проб, позволяющее осуществлять фильтрацию не менее 1000 л проточной водопроводной воды. В экспе­риментальных условиях подобраны следующие сор­бирующие материалы отечественного производства и оптимальные параметры их использования: тип сор­бирующего материала - ФИБАН А5 или ФИБАН А6, масса - 15 г, объем пропускаемой питьевой воды - 1000 л, скорость ее протекания - 40-45 л/ч.

Разработана технология выявления изолирован­ных из питьевой воды норо- и энтеровирусов методом ПЦР в режиме реального времени с гибридизационно-флюоресцентной детекцией. Для этих целей подобра­ны вирусспецифические праймеры и гибридизацион­ные зонды, отработаны оптимальные условия поста­новки реакции, выбран состав реакционной смеси и температурный режим амплификации.

На основе выполненных разработок создана экспе­риментальная партия «Набора для отбора проб и ин­дикации кишечных вирусов в питьевой воде методом ПЦР» (далее Набор), включающего 2 комплекта реа­гентов: 1) для отбора и концентрирования проб питье­вой воды (комплект № 1) и 2) для ПЦР-детекции улов­ленных из питьевой воды норо- и энтеровирусов (ком­плект № 2). Лабораторные испытания разработанного Набора в условиях искусственной вирусной контамина­ции питьевой показали его достаточно высокую эффек­тивность. Так, специфичность улавливания и выявле­ния энтеровирусов составила 100% (50 положительных проб из 50 контаминированных), норовирусов - 98% (49 положительных проб из 50 контаминированных), что соответствовало заявленным показателям контро­ля качества Набора при пороге чувствительности ПЦР-детекции 5х10³ ГЭ/мл. В ходе полевых испытаний На­бора при санитарно-вирусологическом исследовании 85 проб воды, отобранных из городского водопровода с помощью комплекта № 1 и далее исследованных мето­дом ПЦР с использованием комплекта № 2, в 2 пробах были обнаружены энтеровирусы. Наличие энтеровирус­ных агентов в данных пробах и отсутствие энтеровирус­ного загрязнения в остальных было подтверждено в па­раллельных исследованиях при использовании коммерче­ской ПЦР-тест-системы.

Полученные результаты указывают на возможность широкого практического использования разработанного Набора для осуществления санитарно-вирусологического контроля качества питьевой воды на предмет выявления ее контаминации энтеро- и норовирусами.