Как и в большинстве развитых стран мира, лабора торная диагностика ротавирусной инфекции (РВИ) в Республике Беларусь проводится методом иммунофер­ментного анализа (ИФА), главным образом, с помощью тест-системы «РОТА-АГ» по ТУ BY100558032.108-2004 с изменениями и конфирматорного тест-набора «РОТА-АГ-Конф» по ТУ BY100558032.109-2004, раз­работанных и производимых в ГУ «РНПЦ эпидемио­логии и микробиологии». Экспресс-диагностика РВИ вне оснащенной лаборатории может осуществляться с помощью тест-системы для определения антигенов ро­тавирусов методом иммунохроматографического ана­лиза (ИХМ) с подтверждающим тестом «РОТА-АГ-ИХМ-Конф» по ТУ BY100558032.160-2009. Однако от­ечественного набора для экспресс-диагностики другой весьма распространенной и клинически трудно диф­ференцируемой от РВИ острой кишечной инфекции (ОКИ) аденовирусной природы до настоящего време­ни не было.

Нашей задачей являлась разработка и освоение про­изводства тест-системы для определения обеих указан­ных ОКИ методом иммунохроматографического анали­за с конфирматорным тестом. Отличительной конструк­тивной особенностью разработанной тест-системы яв­ляется наличие в ней компонентов, позволяющих вы­полнять подтверждающий тест методом ИХМ.

Разработанное лекарственное средство предназна­чено для качественного иммунохроматографического определения и подтверждения выявления антигенов ротавирусов и аденовирусов в биологических субстра­тах при проведении профессиональной специфической лабораторной диагностики этих инфекций у пациентов с клиникой ОКИ.

Тест-система представляет набор, состоящий из 10 компонентов, и имеет следующую комплектацию:

№ 1. Тест-кассета.

№ 2. Буферный раствор объемом для приготовления проб.

№ 3. Буферный раствор объемом для растворения иммунобиологических компонентов.

№ 4. Антиген ротавирусный (ПК-РОТА).

№ 5. Антиген аденовирусный (ПК-АДЕНО).

№ 6. Неинфицированная культура клеток (ОК).

№ 7. Сыворотка крови кролика, не содержащая ан­титела к ротавирусам (КР-РОТА).

№ 8. Асцитическая жидкость мышей, не содержа­щая антител к аденовирусам (КР-АДЕНО).

№ 9. Сыворотка крови кролика, содержащая антите­ла к ротавирусам (КфР-РОТА).

№ 10. Иммунная асцитическая жидкость мышей, содержащая антитела к аденовирусам (КфР-АДЕНО).

• Инструкция по применению.

Указанная комплектация лекарственного средства позволяет выполнить диагностическое исследование и подтвердить его специфичность без использования дополнительных реагентов и оборудования. В каждом наборе имеется 20 диагностических тестов, включая контроли и подтверждающие тесты.

Исследование проводится в два этапа: прямой (вы­являющий одновременно антигены ротавирусов и аде­новирусов) тест и тест, подтверждающий специфич­ность полученных положительных результатов.

Прямой тест. Иммунологическая реакция по опре­делению антигенов рота- и аденовирусов осущест­вляется на мембране с предварительно нанесенными ингредиентами. Мембрана помещена в кассету (тест-кассета), на которой имеются окна с зонами внесения исследуемой пробы (S) и учета результатов реакции (Р). Содержащийся в пробе рота- или аденовирусный антигены специфически взаимодействует с соответ­ствующими моноклональными антителами, ковалент­но связанными с красными или синими микросфера­ми. Микросферы с образовавшимися на них иммунны­ми комплексами под действием капиллярных сил ми­грирует по мембране и пересекают поперечные поло­ски ковалентно связанных с мембраной противорота­вирусных и противоаденовирусных иммуноглобули­нов в зоне Р. Мигрирующие на красных и синих микро­сферах иммунные комплексы специфически взаимо­действуют с антителами и останавливаются на уровне этих полосок. О наличии антигенов ротавирусов в про­бе свидетельствует появление красной полоски в зоне Р, о наличии аденовирусных антигенов - появление синей полоски в зоне Р. Зеленая полоска служит вну­тренним контролем каждой тест-кассеты.

Подтверждающий тест. Добавление в положитель­ную на содержание ротавирусного антигена пробу про­тиворотавирусных антител в специально подобранной концентрации (КфР-РОТА) приводит к образованию им­мунных комплексов и специфическому блокированию антигена. При постановке прямого иммунохроматогра­фического теста ротавируссодержащая проба с добав­ленным конфирматорным реагентом не должна образо­вывать красной полоски в зоне Р. Добавление в положи­тельную на содержание аденовирусного антигена пробу противоаденовирусных антител в специально подобран­ной концентрации (КфР-АДЕНО) приводит к образова­нию иммунных комплексов и специфическому блокиро­ванию антигена. При постановке прямого иммунохро­матографического теста аденовируссодержащая проба с добавленным конфирматорным реагентом не должна образовывать синей полоски в зоне Р.

Лекарственное средство зарегистрировано в Мини­стерстве здравоохранения Республики Беларусь, реги­страционное удостоверение № ИМ-7.99763.

Вид патентной защиты: патент РФ № 1687613 от 19.12.2009; патентовладелец - ГУ «РНПЦ эпидемио­логии и микробиологии».