Успешное приживление гемопоэтическо­го трансплантата зависит от количества клеток-предшественниц миелоидного ряда, ответственных за быстрое восстановление уровня нейтрофилов и тромбоцитов в раннем периоде восстановления кроветво­рения. Одним из эффективных решений проблемы клеточной недостаточности трансплантата пуповин­ной крови служит увеличение количества CD34+ кле­ток путем наращивания (экспансии) ex vivo. Другим решением является дополнительное их выделение из плаценты после забора основного объема пуповинной крови.

Цель - разработать и оптимизировать методы вы­деления и экспансии гемопоэтических стволовых кле­ток из плаценты и пуповинной крови, изучить эффек­тивность экспансии CD34-положительной популяции клеток и исследовать закономерности ее пролифера­ции и дифференцировки в миелоидном направлении.

Культивирование гемопоэтических стволовых кле­ток на подложке мезенхимных стромальных клеток костного мозга (МСК КМ) человека приводит к эффек­тивной экспансии кроветворных предшественников in vitro. Наряду с КМ можно использовать альтернатив­ные источники МСК - ткани плаценты и пуповины. В результате исследований проведен подбор условий по­лучения и культивирования in vitro МСК пуповинной крови, пуповины и плаценты человека, охарактеризо­ван их фенотип, изучен пролиферативный потенциал. Оптимизированы методы забора, выделения и культи­вирования МСК. Определен протокол выделения гемо­поэтических CD34-положительных клеток пуповин­ной крови для последующей экспансии ex vivo пред­шественников миелоидного ряда. Разработана методо­логия экспансии кроветворных предшественников пу­повинной крови, в т. ч. с использованием МСК плацен­тарного происхождения. Подготовлен лабораторный регламент получения СD34-положительных клеток из плаценты человека после забора основного объема пу­повинной крови. Показана возможность увеличения количества СD34-положительных клеток пуповинно-плацентарного происхождения в культуре в среднем более чем в 25 раз за период до одной недели. Разра­ботан лабораторный регламент экспансии гемопоэти­ческих предшественников пуповинно-плацентарного происхождения.