Цель исследования: разработка и внедрение совре­менной технологии ДНК-анализа с целью снижения уровня инвалидности и смертности от наследствен­ных и врожденных заболеваний, улучшения качества медико-генетического консультирования и ранней про­филактики в семьях высокого риска.

Муковисцидоз (МВ), или кистозный фиброз подже­лудочной железы - одно из наиболее распространен­ных моногенных наследственных заболеваний, насле­дуемое по аутосомно-рецессивному типу. Причиной являются патологические изменения в гене, кодирую­щем трансмембранный регуляторный белок муковис­цидоза (ТРБМ). В настоящее время идентифицировано более 1000 мутаций, приводящих к МВ, большинство из которых является редкими.

Исследуемую группу составили пациенты с МВ (50 человек), у которых одна из мутаций в гене не была идентифицирована после стандартного тестирования с целью выявления частых мутаций dF508, CFTR2,3del, 2184insА. Диагноз у всех пациентов был установлен по результатам потовой пробы (> 60 ммоль/л Cl).

Тестирование образцов ДНК выполнялось для идентификации редких мутаций с использованием тех­нологии сканирования нуклеотидной последователь­ности ДНК гена ТРБМ. На первом этапе образцы ДНК от пациентов протестированы методом ДВЭЖХ на на­личие изменений нуклеотидной последовательности в «горячих» экзонах 3, 4, 6, 11, 13, 17b и 21. Результаты оценивались по изменениям профиля хроматограммы, отличным от нормального контроля. В общей сложно­сти дополнительные пики на хроматограмме были вы­явлены в 15 образцах. Семь образцов имели изменения последовательности в 13-м экзоне и три - в 21-м.

Для образцов с изменениями выполнено прямое определение нуклеотидной последовательности мето­дом ресеквенирования. Мутации были установлены во всех 15 образцах с зафиксированными изменениями по данным дВЭЖХ анализа.

Мутации, обнаруженные в гене ТРБМ, представле­ны в табл. 1